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水稻叶绿素含量的简易测定

来源: 本站  类别:技术文章  更新时间:2014-09-16 11:02:21  阅读

水稻叶绿素含量直接影响光合作用强度,并与氮素营养有密切关系。用叶绿素计了解与控制叶绿素含量,对提高植物的产量有一定意义。自从Mackinney (1941) 建立的提取和测定叶绿素含量的方法以来, 直至Hiscox (1979)等用二甲亚矾(DMSO) 直接浸泡测定高等植物叶绿素含量,还有陈福明、张宪政等人提出了丙酮乙醇水混合液法, 但上述测定方法还存在烦琐的弊病。为此,我们进行了一些改进,测试方法简便易行。
1  测定方法和步骤
  在水稻各生育时期自上而下取三片叶,用剪刀剪碎(长1 cm 以下) ,各处理分别称2 g 鲜重,放入带塞的三角瓶中,并分别用95 %乙醇和80 %丙酮作为浸提液,将浸提液小心倾入100 ml 容量瓶中,定容至100 ml 。摇匀后, 吸5 ml 该液于50 ml 容量瓶中, 用95 %乙醇和80 %丙酮分别定容至50 ml ,然后用分光光度计比色测定。使用仪器:叶绿素测量仪http://www.ny-17.com/product/32.html,叶绿素含量测定仪http://www.ny-17.com/product/31.html
2  结果
2. 1  不同有机溶剂浸提叶绿素含量的比较 由表1 看出,用95 %乙醇作为浸提液,测得的叶绿素含量在所有处理中均比用80 %丙酮作浸提液的高。其差值平均为0. 274 ±0. 204 ,平均高13. 10 %。说明用95 %乙醇浸提效果比80 %丙酮的好。
2. 2  叶绿素浸提母液降解速率的对比 据前人报道,叶绿素浸提液在光照条件下会迅速降解,其速率比在黑暗条件下要高10 倍之多。为此, 我们对暗保存下的叶绿素浸提液降解速率进行了分析统计,结果表明:保存一天的降解速率为0. 46 ±2. 218 %, 差异不显著;保存一星期的降解速率为14. 0 ±2. 446 %(见表2 、3) 。
3  小结
3. 1  试验结果表明, 水稻叶绿素含量的测定以选用95 %乙醇作为浸提液比用80 %丙酮效果较好。浸提时间以8 h 以上为宜,24 h 更彻底。籼稻一般比粳稻较易提取,浸提时间可缩短在8 h 内。粳稻浸提时间可略加长。
3. 2  在暗保存下,叶绿素浸提母液降解速度一天内差异不显著,一星期降解速率为14. 0 ±2. 446 %。这对在实际工作中、在仪器发生故障的情况下采取应变措施是有参考意义的。

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